中南林業(yè)科技大學(xué)林業(yè)生物技術(shù)省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室在重要真菌毒素赭曲霉素A的生化檢測(cè)研究領(lǐng)域取得進(jìn)展，研究成果連續(xù)發(fā)表在生物傳感領(lǐng)域重要期刊《Biosensors and Bioelectronics》（Top期刊、SCI一區(qū)期刊，IF: 10.257）和《Sensors and Actuators B: Chemical》（Top期刊、SCI一區(qū)期刊，IF: 7.1）。

真菌毒素是由絲狀真菌等微生物產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物，也包含真菌毒素相關(guān)的衍生物。真菌毒素具有很強(qiáng)的穩(wěn)定性和毒性，一旦產(chǎn)生很難消除，不僅能引起谷物等糧食的腐敗變質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)流失和品質(zhì)降低，還能導(dǎo)致急性中毒、致癌、致突變、致畸等嚴(yán)重后果。赭曲霉素A（OTA）是曲霉屬和青霉屬一些產(chǎn)毒菌株的次級(jí)代謝產(chǎn)物，是一種重要真菌毒素，污染范圍廣，具有強(qiáng)烈腎毒性、神經(jīng)毒性、免疫毒性，并具有致癌、致畸、致突變性。因此，為了保障人類(lèi)和動(dòng)物的健康以及生態(tài)環(huán)境的安全，對(duì)真菌毒素如赭曲霉素A進(jìn)行檢測(cè)分析和定量監(jiān)測(cè)具有重大意義。

中南林業(yè)科技大學(xué)林業(yè)生物技術(shù)省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室劉高強(qiáng)、王永紅課題組圍繞赭曲霉素A檢測(cè)，利用生物傳感技術(shù)首次提出了一種基于RecJf外切酶循環(huán)和β-環(huán)糊精主客體識(shí)別作用檢測(cè)赭曲霉素A（OTA）的方法（Biosensors and Bioelectronics, 2019, 124:82-88）。通過(guò)外切酶循環(huán)作用和β-環(huán)糊精富集作用實(shí)現(xiàn)了目標(biāo)的信號(hào)放大檢測(cè)。在最佳條件下，信號(hào)與目標(biāo)濃度對(duì)數(shù)在10 pg/mL至10.0 ng/mL范圍內(nèi)保持線(xiàn)性關(guān)系，檢測(cè)限低至3 pg/mL。這種檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)單、成本低，且在檢測(cè)限、檢測(cè)范圍和靈敏度方面令人滿(mǎn)意，可以通過(guò)更換相應(yīng)的適體，實(shí)現(xiàn)多種目標(biāo)檢測(cè)。

赭曲霉素A的電化學(xué)檢測(cè)

此外，還利用三股螺旋適體探針（TAP）發(fā)展了一種新的化學(xué)發(fā)光生物傳感器用于測(cè)定赭曲霉素A（Sensors and Actuators B: Chemical. 2019, 298:126867）。設(shè)計(jì)的TAP結(jié)構(gòu)主要包含三個(gè)部分：環(huán)部一段可以捕獲目標(biāo)分子的核酸適體DNA，用作信號(hào)探針的DNA處于中間部分，莖部有一段可以與信號(hào)探針部分互補(bǔ)的DNA序列。利用信號(hào)探針能和Hemin結(jié)合形成G-四鏈體并能夠催化魯米諾-過(guò)氧化氫化學(xué)發(fā)光反應(yīng)體系，實(shí)現(xiàn)了對(duì)赭曲霉素A的定量分析。在最優(yōu)條件下，化學(xué)發(fā)光信號(hào)與目標(biāo)濃度在0.1 ng/mL ~ 2.0 ng/mL內(nèi)保持線(xiàn)性相關(guān)，檢出限低至0.07 ng/mL。這是一種無(wú)需進(jìn)行信號(hào)標(biāo)記便可實(shí)現(xiàn)OTA測(cè)量的化學(xué)發(fā)光方法，具有設(shè)計(jì)新穎、簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、高靈敏、高特異性等優(yōu)點(diǎn)。

赭曲霉素A的化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)