SBC ceRNA芯片
環(huán)狀RNA(circRNA)在真核生物中廣泛存在的發(fā)現(xiàn)使轉(zhuǎn)錄家族又增加了重要一員,lncRNA研究也正如火如荼,復(fù)雜的轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究如何走捷徑?SBC ceRNA芯片是一個(gè)全轉(zhuǎn)錄組+產(chǎn)品,不僅同時(shí)檢測(cè)circRNA、lncRNA等非編碼RNA和編碼蛋白的mRNA,并同時(shí)獲得circRNA、lncRNA功能預(yù)測(cè)結(jié)果,為進(jìn)一步功能研究提供參考。circRNA、lncRNA作為競(jìng)爭(zhēng)性?xún)?nèi)源RNA(ceRNA),競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miRNA,從而調(diào)控miRNA靶基因的表達(dá),這樣的作用方式廣泛存在,ceRNA芯片也同樣是ceRNA研究的不二之選。
基因芯片作為一個(gè)成熟的技術(shù)平臺(tái),二十幾年來(lái)被廣泛用于基因表達(dá)譜的檢測(cè)。對(duì)于lncRNA、circRNA基因表達(dá)譜檢測(cè),基因芯片比RNA測(cè)序有許多重要且不可替代的優(yōu)勢(shì):
芯片利用寡核苷酸探針與目的基因堿基互補(bǔ)雜交、掃描獲得的熒光信號(hào)來(lái)檢測(cè)表達(dá)豐度。與RNA測(cè)序相比,芯片檢測(cè)的準(zhǔn)確性受低豐度轉(zhuǎn)錄本的影響更小,更適合檢測(cè)整體表達(dá)豐度低的lncRNA、circRNA。由于提高測(cè)序深度會(huì)增加加工不完全RNA的檢出機(jī)率,提高測(cè)序深度可能引起可靠性的下降。
lncRNA不具有蛋白的翻譯起止位置,RNA測(cè)序?qū)ncRNA轉(zhuǎn)錄本鑒定的可靠性要低于mRNA。而芯片探針較短可以進(jìn)行特異性設(shè)計(jì),檢測(cè)更特異。
circRNA具有特殊的環(huán)狀結(jié)構(gòu),但其線(xiàn)性序列和線(xiàn)性基因難以區(qū)分,需要單獨(dú)的去線(xiàn)性建庫(kù)才能利用RNA測(cè)序來(lái)檢測(cè)circRNA,不能同時(shí)檢測(cè)多種RNA。
芯片設(shè)計(jì)策略:
Human ceRNA芯片設(shè)計(jì)流程圖
探針設(shè)計(jì)策略:

芯片特點(diǎn):
·circRNA探針設(shè)計(jì)在反向剪接位點(diǎn),特異性強(qiáng)
·技術(shù)成熟、靈敏度高:芯片比測(cè)序更適合檢測(cè)表達(dá)量低的lncRNA、circRNA
·實(shí)驗(yàn)周期短,數(shù)據(jù)分析方法成熟、快速
·收錄lncRNA、circRNA全面、可靠,并及時(shí)更新
·功能機(jī)制預(yù)測(cè),為深入研究circRNA、lncRNA生物學(xué)功能提供參考,包括:
高保守lncRNA;lncRNA結(jié)合蛋白預(yù)測(cè);lncRNA生物學(xué)功能預(yù)測(cè);lncRNA亞細(xì)胞定位;疾病相關(guān)lncRNA預(yù)測(cè);super enhancer lncRNA;enhancer lncRNA;疾病相關(guān)circRNA預(yù)測(cè)。
主要參數(shù):

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