動(dòng)物細(xì)胞工程概述:本章重點(diǎn)和難點(diǎn)：
了解動(dòng)物細(xì)胞特性及其培養(yǎng)特點(diǎn)，充分認(rèn)識(shí)動(dòng)物細(xì)胞工程在疾病診斷和治療中的應(yīng)用前
景。
第一節(jié)、動(dòng)物細(xì)胞特性
一、動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞比較
二、動(dòng)物細(xì)胞在活體內(nèi)的特性
? 動(dòng)物細(xì)胞在胚胎期即已高度分化，而且這種分化是不可逆轉(zhuǎn)的，
? 活體內(nèi)的動(dòng)物細(xì)胞按照分裂能力可以分為三大類：第一類是能保持繼續(xù)分裂能力的細(xì)
胞；第二類細(xì)胞群是永久失去分裂能力的細(xì)胞；第三類是靜止細(xì)胞群，即所謂的G0細(xì)胞。
三、培養(yǎng)條件下動(dòng)物細(xì)胞的生長(zhǎng)特性
離體培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可分為兩類：貼壁依賴型(anchorage-dependent)、貼壁非依賴型
(anchorage-independent)和間性貼壁細(xì)胞。
四、培養(yǎng)條件下動(dòng)物細(xì)胞的生理特點(diǎn)
1、動(dòng)物細(xì)胞的分裂周期長(zhǎng)
各類細(xì)胞分裂周期時(shí)間表
細(xì) 胞 類 別 細(xì)胞周期時(shí)間（h）
G1 S G2 M 合 計(jì)
人胚肺成纖維細(xì)胞（WI－38） 8 8.0 4.0 0.8 20.8
人T 細(xì)胞 10.5 7.6 3.2 0.8 21.1
小鼠腹水癌細(xì)胞 5.7 8.5 3.8 1 19
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（CHO） 4.7 4.1 2.8 0.8 12.4
急性淋巴性白血病細(xì)胞 1～10d 20 2~3d 1.0 2~20d
2、有限細(xì)胞系和永久細(xì)胞系
? 動(dòng)物細(xì)胞離體培養(yǎng)起始物，我們稱之為原代培養(yǎng)（primary culture）。經(jīng)繼代培養(yǎng)后即成
為有限細(xì)胞系(finite cell line)。
? 大多數(shù)細(xì)胞系在有限的代數(shù)內(nèi)以不變的形式增殖，當(dāng)超過(guò)有限世代后，它們可能有兩種
情況，一是衰老死亡，二是發(fā)育成永久細(xì)胞系或稱連續(xù)細(xì)胞系。
? 有限細(xì)胞系轉(zhuǎn)換成永久細(xì)胞系的過(guò)度期稱為轉(zhuǎn)換期(crisis)，其轉(zhuǎn)換過(guò)程在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
中稱為體外轉(zhuǎn)化(in vitro transformation)。
? 永久細(xì)胞系有如下特征：細(xì)胞形態(tài)變化，如細(xì)胞變小，黏附性減少，具有較高的核質(zhì)
比；生長(zhǎng)速率增加，倍增時(shí)間縮短；對(duì)血清的依賴性減?。毁N壁依賴性降低；細(xì)胞異倍
體和非整倍體增加，細(xì)胞接種到體內(nèi)后，生癌率上升。
3、動(dòng)物細(xì)胞的環(huán)境敏感性
第二節(jié)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境與營(yíng)養(yǎng)要求
一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境要求
1、溫度
2、pH
3、溶氧及氣體環(huán)境
4、滲透壓
二、動(dòng)物細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)需求
1、天然培養(yǎng)基
? 其優(yōu)點(diǎn)是營(yíng)養(yǎng)成分豐富、培養(yǎng)效果好；缺點(diǎn)是成分復(fù)雜、個(gè)體差異大、來(lái)源有限。
? 天然培養(yǎng)基的種類主要包括生物性體液（如血清）、組織浸出液（如胚胎浸出液）、凝
固劑（如血漿）、水解乳蛋白等。
2、合成培養(yǎng)基
? 合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分，用化學(xué)物質(zhì)對(duì)細(xì)胞體內(nèi)生存環(huán)境中已知物質(zhì)在體
外人工條件的模擬，經(jīng)過(guò)反復(fù)試驗(yàn)篩選、強(qiáng)化和重新組合后形成的培養(yǎng)基。
? 合成培養(yǎng)基的優(yōu)點(diǎn)：既能給細(xì)胞提供一個(gè)近似于體內(nèi)的生存環(huán)境，又便于控制和提供標(biāo)
準(zhǔn)化體外生存環(huán)境。
? 合成培養(yǎng)基的主要成分：氨基酸、維生素、糖類、無(wú)機(jī)離子和其它輔助成分。
§3、動(dòng)物細(xì)胞工程的主要技術(shù)及其實(shí)踐意義
一、單克隆抗體技術(shù)在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
單克隆抗體技術(shù)的核心是用骨髓瘤細(xì)胞(myeloma cell)與經(jīng)特定抗源免疫刺激的B淋巴細(xì)
胞(antigen stimulated B lymphoblast)融合得到雜交瘤細(xì)胞(hybridoma cell)，雜交瘤細(xì)胞既能象
骨髓瘤細(xì)胞那樣在體外無(wú)限增殖，又具有B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的能力。因此，單克隆
抗體技術(shù)又稱為雜交瘤技術(shù)(hybridoma technology)。
? 單克隆抗體具有高度的特異性與靈敏性，可以廣泛地由于臨床醫(yī)學(xué)的疾病診斷，以提高
疾病診斷的準(zhǔn)確性。
? 利用單克隆抗體技術(shù)可以生產(chǎn)各種免疫疫苗，這不僅能大大降低生產(chǎn)成本，同時(shí)也增加
了疫苗的安全性。
? 單克隆抗體還有可能用于某些腫瘤的治療，是人類戰(zhàn)勝癌癥十分有望的潛在技術(shù)。
? 單克隆抗體技術(shù)還可廣泛用于各種基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究，從而推動(dòng)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展。
二、胚胎移植和核移植技術(shù)在畜牧業(yè)中的應(yīng)用
? 利用胚胎技術(shù)可以以工廠形式大批量生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)胚胎，從而可以降低胚胎成本，擴(kuò)大移植
胚的來(lái)源，使農(nóng)畜動(dòng)物胚胎移植的推廣應(yīng)用成為可能。
? 體外受精可以準(zhǔn)確地確定受精的時(shí)間和胚胎發(fā)育階段，因此，利用體外受精技術(shù)進(jìn)行核
移植、性別控制和基因?qū)?，可望工廠化生產(chǎn)遺傳性穩(wěn)定、生產(chǎn)性能優(yōu)良的家畜，以加
快農(nóng)畜良種化。
三、動(dòng)物細(xì)胞大量培養(yǎng)生產(chǎn)次生產(chǎn)物